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테트라메틸벤지딘(TMB), CAS 54827-17-7은 분자식 C16H20N2를 갖는 화학물질로 퍼옥시다제 및 B형 간염 항원의 염색제로 사용됩니다. 백색 내지 황색 분말. TMB는 ELISA 반응에서 카탈라아제의 기질로 사용됩니다. 이 기질은 370 또는 620-650 nm에서 분광 광도계로 판독할 수 있는 수용성 연청색 최종 생성물을 생성할 수 있습니다. TMB 반응은 2M H2SO4(노란색)로 종료할 수 있으며 450 nm에서 읽을 수 있습니다. 따라서 TMB는 혈액, 헤모글로빈 및 과산화효소를 측정하는 데 사용되는 민감하고 구체적인 시약입니다. 비발암성 발색 시약인 TMB는 ELISA(효소 결합 면역흡착 분석), 임상 생화학 테스트 및 기타 분야에서 널리 사용됩니다.

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화학식 |
C16H20N2 |
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정확한 질량 |
240 |
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분자량 |
240 |
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m/z |
240 (100.0%), 241 (17.3%), 242 (1.4%) |
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원소 분석 |
C, 79.96; H, 8.39; N, 11.66 |
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검출 감도가 높고 안정성이 강해 기존의 발암성 벤지딘 시약을 대체할 수 있습니다. 주로 간염 바이러스 감지, 임신 테스트, 대변 잠혈 분석 등 10개 이상의 감지 프로젝트에 사용되며 의료 진단, 법의학 식별 및 환경 모니터링 시나리오를 포괄합니다.

기존 비색 시약과 달리테트라메틸벤지딘기존 벤지딘 시약보다 검출 감도가 10배 이상 높으며 최소 검출 한계는 최대 나노몰 수준입니다. 비색 제품은 수용성이 좋고 침전이 없어 완전 자동화된 고처리량 면역분석 장비의 적용 요구 사항을 완전히 충족합니다.{2}} 현재 글로벌 IVD 산업에서 없어서는 안 될 핵심 핵심 원자재입니다.
임상 체외 진단 분야에서 핵심 발색 기질의 활용
임상 체외 진단 분야에서 TMB는 ELISA(효소 결합 면역흡착 분석)의 핵심 발색 기질이자 대부분의 면역분석 키트의 핵심 기능 구성 요소입니다. 전염병의 혈청학적 검출 현장에서 배경색이 매우 낮고 검출 민감도가 높은 TMB 발색계 기반의 BB형 간염, C형 간염 항체, AIDS 항체 등 감염성 질환을 선별하는 ELISA 키트는 국내 혈액 검사소의 대규모 혈액 선별을 위한 주류 기술 방식이 되었습니다.{2}}
국내 혈액원의 적용 데이터에 따르면 TMB를 발색 기질로 사용하는 혈액 스크리닝 키트의 경우 BB형 간염 표면 항원의 최소 검출 한계가 0.1IU/mL에 도달할 수 있는 것으로 나타났습니다.
기존 OPD 발색 시스템에 비해 위음성 진단 오류율이 90% 감소해 수혈 관련 감염병의 전파 위험을 원천적으로 완벽하게 차단한다. 3차 병원의 일상적인 외래 감염병 검사에서 TMB 비색 시스템 ELISA 키트는 검출 결과의 배치 간 차이를 5% 이내로 제어하고 기존 방법에 비해 검출 속도를 두 배로 향상시키며 하루에 수천 개의 샘플에 대한 높은 처리량 테스트를 완료할 수 있습니다{3}}.
대규모 인구 집단의 전염병 조기 검사 요구 사항을 완벽하게 충족합니다.- 호르몬 및 종양 표지자의 임상적 검출에서 TMB 비색 시스템의 고감도 이점이 더욱 강조됩니다. TSH, T3, T4 등과 같은 갑상선 기능 호르몬 지표의 검출에서 TMB 발색의 동적 선형 범위는 기존 발색 시약보다 3배 더 넓습니다. 이는 건강한 사람부터 갑상선 기능 항진증 및 갑상선 기능 저하증 환자까지 전체 농도 범위를 정확하게 포괄할 수 있으며 고농도 샘플에서 후크 효과로 인한 잘못된 경보를 피할 수 있습니다.
종양표지자의 임상적 검출에 있어서 TMB 기반의 ELISA 키트는 혈청 중 불과 몇 ng/mL의 농도로도 CEA, AFP 등의 종양표지자를 정확하게 검출할 수 있어 암의 조기 선별 및 수술 후 재발 모니터링을 위한 신뢰할 수 있는 정량적 결과를 제공합니다.
중국 3차 병원 병리과의 통계 데이터에 따르면 TMB 비색 종양 표지자 조합 검출 체계를 사용한 초기 위장관 종양 검출률은 기존 방법보다 25% 더 높은 것으로 나타났습니다. 코로나19 항원의 신속한 검출을 위한 보조진단 시나리오에서 TMB는 콜로이드 금법이 아닌 효소 발색의 핵심 성분이다.


이는 코로나-19 항원에 대한 높은 처리량의 ELISA 검출 시스템에 적용됩니다. 검출 감도는 전통적인 콜로이드 금 방법보다 10배 더 높으며 바이러스 부하가 낮은 단계에서 양성 검출을 달성할 수 있어 초기 감염자의 진단 실패율을 크게 줄일 수 있습니다. 완전 자동화된 화학발광 면역분석의 지원 시스템에서 TMB는 HRP(양고추냉이 과산화효소) 직접 화학발광을 위한 강화된 기질로서 발광 신호의 강도와 안정성을 크게 향상시키고, 화학발광 검출의 신호{5}} 대-잡음 비율을 4배 증가시키며, 검출 결과의 CV 값을 3% 이내로 제어하여 고급형의 고정밀 검출 요구 사항을 완전히 충족할 수 있습니다.- 자동화된 면역분석 장비.
생물학 연구 및 분자 생물학 분야에 널리 적용됩니다.
생물학 연구 분야에서는테트라메틸벤지딘웨스턴 블롯 실험에서 HRP 표지된 2차 항체에 대해 선호되는 발색성 기질이며 분자 생물학 실험실에서 가장 일반적으로 사용되는 발색성 시약 중 하나입니다. 전통적인 Western Blot 실험에서 TMB 화학발광 강화 비색 시스템을 사용하면 pg 수준만큼 낮은 표적 단백질을 검출할 수 있습니다.
기존 DAB 비색법과 비교하여 검출 감도가 2배 증가했으며 세포 내 존재량이 적은 신호 전달 경로 단백질과 전사 인자의 발현 변화를 쉽게 식별할 수 있습니다. 국내 대학 생물학 연구실의 비교 실험 데이터에 따르면 최적화된 TMB 고감도 발광 솔루션을 사용하면 Western Blot의 개발 시간이 기존 30분에서 10초 미만으로 단축되었으며 배경 밴드가 깨끗하고 불순물이 없는 것으로 나타났습니다. 분자량 차이가 1kDa에 불과한 두 개의 유사한 단백질 밴드를 명확하게 구분할 수 있어 단백질 면역블로팅 실험의 신뢰성이 크게 향상됩니다.
면역조직화학 및 면역조직화학의 실험 시나리오에서 개선된 TMB 염색 시스템은 안정적인 청색 불용성 생성물을 생성하고 조직 조각 및 세포 슬라이드에서 표적 단백질의 발현 위치를 정확하게 찾을 수 있습니다. 전통적인 DAB 갈황색 염색과 비교하여 파란색 TMB 염색 제품은 DAB 염색의 일반적인 가장자리 확산 및 배경 비{1}}염색 문제 없이 헤마톡실린으로 염색된 파란색 보라색 핵으로 부드러운 색상 구별을 형성합니다. 신경 조직의 신경전달물질 단백질 위치화 및 종양 조직의 PD{3}}L1 단백질 발현 해석 실험에서.

TMB 염색 결과의 인식은 기존 염색 방법보다 훨씬 우수하여 연구자가 단백질 세포내 국소화의 형태를 보다 정확하게 관찰하는 데 도움이 됩니다.
효소 활성 분석의 기본 연구 시나리오에서 TMB는 미량 퍼옥시다제 활성을 결정하기 위한 특정 기질입니다. TMB 산화 비색 분광광도법을 기반으로 시료 내 1ng/mL의 낮은 농도에서도 HRP 효소 활성을 정확하게 검출할 수 있습니다. 이는 식물 과산화효소와 미생물 항산화 효소 활성을 연구하기 위한 고전적인 실험 방법입니다. 단일-분자 효소학의 최전선 연구에서 고정화된 TMB 분자는 단일 HRP 효소 분자의 촉매 작용 하에 국소적인 색 침전물을 생성할 수 있습니다.
단일 효소 분자의 공간 분포와 촉매 동역학을 광학 현미경을 통해 직접 관찰할 수 있어 단일 분자 효소학의 기초 연구에 직관적인 관찰 방법을 제공합니다.{0}} 핵산 혼성화의 검출 시나리오에서는 HRP가 핵산 프로브에 표지되고 샘플 내 표적 핵산 서열이 TMB 색 강도에 의해 정량적으로 검출됩니다. 복잡한 형광 검출 장비 없이도 저렴한-비용으로 핵산 정성 및 정량 검출을 완료할 수 있습니다. 이는 풀뿌리 과학 연구 실험실에서 유전자 변형 구성 요소의 유전자 타이핑 및 스크리닝 실험에 널리 사용되었습니다.
환경 모니터링 및 식품 안전 분야의 고감도 감지 애플리케이션
환경 모니터링 분야에서는테트라메틸벤지딘물 속의 미량의 과산화수소와 중금속 이온을 신속하게 검출하기 위한 고감도 산화 비색 시약으로 널리 사용됩니다. 식수 안전 테스트 시나리오에서 TMB 기반 과산화효소 시뮬레이션 비색 감지 시스템은 국가 식수 위생 기준의 한도 요구 사항보다 훨씬 낮은 0.01mg/L까지 식수에 잔류 과산화수소 소독제를 신속하게 감지할 수 있습니다.
검출 과정에는 대형 장비가 필요하지 않으며, 용액의 청색 깊이를 육안으로 관찰하여 반정량적 판단이 완료될 수 있어 현장의 비상 수질 모니터링에 매우 적합합니다. 수역의 납 및 수은과 같은 중금속 이온의 검출 시나리오에서 기능화된 나노 금 시뮬레이션 퍼옥시다제는 중금속 이온에 특이적으로 반응할 수 있습니다. TMB 색상 강도의 변화를 통해 기존 원자 흡수 분광법에 비해 최대 1nM의 검출 한계와 단 1%의 검출 비용으로 중금속 이온의 높은 선택적 시각화 검출이 가능합니다.
이는 농촌 식수 안전 검사 및 산업 폐수 배출 현장의 신속한 모니터링에 매우 높은 적용 가치를 보여주었습니다.
식품 안전 테스트 분야에서 TMB는 다양한 신속 검출 테스트 스트립의 핵심 발색 구성 요소입니다. 식품 내 농약 잔류물의 효소 억제 검출 시나리오에서 유기인계 농약과 카바메이트 농약은 아세틸콜린에스테라제의 활성을 억제합니다. 과산화효소에 의해 촉매된 TMB 색상 변화의 결합을 통해,-야채의 농약 잔류물에 대한 현장 스크리닝을 10분 이내에 신속하게 완료할 수 있습니다.
검출 감도는 국가 식품 안전 표준의 제한 요구 사항을 충족하며 국내 농산물 시장 및 풀뿌리 규제 부서에서 농약 잔류물에 대해 가장 일반적으로 사용되는 신속한 검출 방법입니다. 식품에 불법적으로 첨가된 클렌부테롤 및 멜라민과 같은 소분자 오염물질의 콜로이드 금 면역크로마토그래피 검출에서 TMB를 기반으로 하는 효소 촉매 강화 비색 기술은 기존 콜로이드 금 테스트 스트립의 검출 감도를 10배 이상 증가시켜 저농도 불법 첨가물을 정확하게 검출하고 위음성 및 검출 누락 가능성을 크게 줄일 수 있습니다.
식품 내 미생물 오염의 신속한 검출 시나리오에서 미생물 대사 중에 생성된 과산화수소를 TMB 색상 반응과 결합하여 2시간 이내에 식품 내 총 박테리아 수의 반정량적 스크리닝을 신속하게 완료할 수 있습니다. 기존의 48시간 플레이트 배양 방법에 비해 검출 시간이 크게 단축되어 식품 제조 기업의 식품 생산 라인의 신속한 품질 관리에 매우 적합합니다. 곡물 및 유지 식품에서 아플라톡신 B1을 신속하게 검출하는 데 있어 TMB 기반 ELISA 검출 시스템은 최소 검출 한계가 0.1μg/kg으로 국가 식품 내 아플라톡신의 엄격한 한계 요구 사항을 완전히 충족합니다. 검출 비용은 대형 기기를 사용하는 질량분석법 검출 방법보다 훨씬 저렴하므로 대규모-곡물 및 기름 식품 안전 조사에 적합합니다.

의 제조방법테트라메틸벤지딘, 구체적인 단계는 다음과 같습니다.
(1) 무수에탄올에 2,6-디메틸아닐린을 첨가하고 촉매와 함께 탈이온수 용액을 첨가하여 35도 이하의 온도에서 반응시킨 후 산화제를 떨어뜨리고 고체를 추출하여 활성화된 2,6-디메틸아닐린을 얻는다.
(2) 염화암모늄 수용액에 활성화된 2,6-디메틸아닐린을 녹인 테트라히드로푸란 용액을 첨가한 후 빙초산과 금속촉매를 첨가한다. 반응이 완료된 후 테트라히드로푸란층을 분리하여 염산용액에 넣고 고체를 여과하여 3,3,5,5-테트라메틸비페닐 조생성물을 얻는다;
(3) 메탄올에 3,3,5,5-테트라메틸비페닐 조생성물을 넣고 아연분말을 넣어 50-70도까지 가열하여 반응시킨 후 뜨거울 때 여과하여 농축하고 에탄올에 넣고 계속 가온하여 용해시키고 여과한 여액을 농축하여 순수한 3,3,3,5,5-테트라메틸비페닐 생성물을 얻는다.
이 방법은 효과적이고 간단할 뿐만 아니라 위험한 원료의 사용을 피할 뿐만 아니라 제품 수율이 높고 공업 생산에 적합합니다.

중요한 발색체 시약입니다. 기존 발색체 시약(예: 벤지딘)과 비교하여 높은 검출 감도와 우수한 안정성이라는 장점이 있으며 발암성 및 돌연변이 유발 효과가 없어 사용하기에 안전합니다. 현재 TMB는 점차 전통적인 염색체 시약을 대체하고 있으며 임상 실험실, 법의학 검사, 범죄 탐지 및 환경 모니터링에 적용됩니다. 특히 임상 생화학적 시험에서 퍼옥시다제의 새로운 기질인 TMB는 효소 면역분석 및 효소{3}}결합 면역흡착 분석에 널리 사용되어 왔습니다. 그러나 가격이 높기 때문에 합성 방법을 연구하는 것이 매우 중요합니다.
FAQ
테트라메틸벤지딘은 어떤 용도로 사용되나요?
3,3',5,5'-테트라메틸벤지딘(TMB)은 흡수 계수가 높고 발암성이 부족한 반응 생성물을 생성하기 때문에 고추냉이 과산화효소- 기반 검출 시스템에 널리 사용되는 발색체입니다.
테트라메틸벤지딘은 독성이 있나요?
피부 접촉 시 과민성을 유발할 수 있습니다. 흡입, 피부 접촉, 삼키면 유해함. 눈, 호흡기, 피부에 자극적입니다. 수생생물에 매우 유독하며 수생 환경에 장기적인-악영향을 일으킬 수 있습니다.
TMB의 기능은 무엇입니까?
TMB는 양 고추 냉이 퍼옥시다제의 발색 기질입니다. 일단 효소에 의해 산화되면 이 기질은 370nm와 652nm에서 흡수되는 파란색 생성물을 생성합니다. 반응을 멈추기 위해 황산이나 인산을 첨가하면 생성물이 노란색으로 바뀌고 450nm에서 흡수됩니다.
테트라메틸벤지딘은 어떻게 생겼나요?
이는 에틸 아세테이트 용액에서 연한 파란색{0}}녹색 액체를 형성하는 흰색 고체입니다. 본 제품은 햇빛과 형광등[1]에 의해 품질이 저하됩니다. 테트라메틸벤지딘은 양고추냉이 과산화효소와 같은 과산화효소에 의해 과산화수소를 물로 환원시키기 위한 수소 공여체 역할을 할 수 있습니다.
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