ACE 031 펩타이드

고상-합성에서는 펩타이드 누락, 펩타이드 삽입 등의 불순물이 발생하기 쉽습니다. 예를 들어, Gln-Asn 결합을 합성할 때 아스파라긴 전위를 피하기 위해 반응 pH(7.5{5}}8.0)를 제어해야 합니다. HBTU 대신 COMU를 사용하는 등 커플링제를 최적화하면 부산물의 비율을 크게 줄일 수 있습니다.

ACE-031은 24-펩타이드이므로 합성 과정에서 부산물이 축적될 위험이 상대적으로 높습니다. '단편 응축 방법'(즉, 먼저 5{11}}10개의 펩타이드 단편을 합성한 후 액상 방법으로 연결하는 방법)을 사용하면 전체 수율을 높일 수 있습니다. 예를 들어 ACE-031은 Ala-Trp-Arg(fragment 1), Gln-Asn-Thr-Arg(fragment 2) 등으로 나누어지고, splicing 전에 각 조각을 별도로 합성한다.

품질 관리 표준: 완제품은 다음 지표를 충족해야 합니다.

 순도: HPLC로 검출된 주요 피크 면적 비율은 98% 이상이고 단일 불순물은 0.5% 이하입니다.

 내용: 아미노산 조성 분석의 오차는 ±15% 이하입니다.

 용해도: 침전 없이 10mg/mL 이상의 농도로 물 또는 DMSO에 쉽게 용해됩니다.

 안정성 : ACE-031의 순도는 -20도에서 3년간 보관 시 2% 이상 감소하지 않습니다.

먼저 멸균수나 PBS(pH 7.4)를 사용해 보세요. 용해도가 불충분한 경우에는 폴리펩티드의 성질에 따라 조정하십시오. ACE-031의 경우 염기성 아미노산(예: Arg, Lys)이 포함된 경우 10%-30% 아세트산을 사용해 보십시오. 산성 아미노산(예: Asp, Glu)이 포함된 경우 13% 암모니아수를 사용하세요. 예를 들어, 특정 연구에서는 ACE-031을 DMSO에 용해시킨 다음 PBS로 목표 농도로 희석하여 세포 독성을 피하기 위해 최종 DMSO 농도가 1% 미만이 되도록 했습니다.

용해되기 전에 수분 흡수를 피하기 위해 폴리펩티드를 실온으로 복원하십시오. 노출 시간을 줄이기 위해 병 뚜껑을 연 후 신속하게 무게를 측정합니다. 용해를 돕기 위해 초음파 또는 가열(50도 이하)을 사용하되 변성을 유발하는 고온은 피하십시오. 용해 후, 반복적인 동결과 해동을 피하기 위해 분취하여 보관하십시오.

쥐의 후두개와 근육에 근육 주사를 하는 경우를 예로 들면, ACE-031은 체중 1kg당 5mg의 농도로 제조되었습니다. 쥐의 평균 체중이 20 g이고 투여 용량이 100 μL인 경우 단일 쥐의 투여량은=5 mg/kg × 0.02 kg=0.1 mg이고 작업 용액 농도는=0.1 mg/0.1 mL=1 mg/mL입니다. 실험에서는 일반적으로 손실을 보상하기 위해 동물의 1~2배의 양을 추가로 준비해야 합니다.

C2C12 근관 분화 모델에서 ACE-031의 농도 범위는 10-100nM입니다. 예를 들어 10nM 작업 용액 준비: ACE-031(분자량 2956.49) 1mg을 취하여 1mL DMSO에 용해하여 1mM 스톡 용액을 얻은 다음 배양 배지로 100,000배 희석하여 10nM이 되도록 합니다.