leucocrystal Violet cas 603-48-5

1 차 얼룩: 그램 염색 절차에서 1 차 얼룩 역할을합니다. 박테리아 도말에 적용될 때, 그것은 그람 양성 및 그램 음성 박테리아의 세포벽에 침투하여 모든 세포를 자주색으로 염색합니다.

박테리아 세포벽 성분과의 반응:

그람 양성 박테리아에서, 세포벽의 두꺼운 펩티도 글리 칸 층은 알코올로 탈색 한 후에도 백혈구 바이올렛-요오딘 복합체 (요오드로 첨가 될 때 형성됨)를 유지한다.

그람 음성 박테리아에서, 더 얇은 펩티도 글리 칸 층 및 외부 막은 복합체를 유지하지 않아서 탈색 및 대조적 인 색상으로 후속 카운터 염색을 초래한다 (예 : Safranin, 핑크색).

그램 염색 방법에는 다음 단계가 포함됩니다.

정착: 박테리아 도말은 박테리아를 죽이고 슬라이드에 부착하기 위해 현미경 슬라이드에 열 고정됩니다.

1 차 염색: 모든 박테리아 보라색을 염색하여 번짐에 적용됩니다.

모르 드 (요오드): 요오드 용액을 첨가하여 박테리아 세포 내에 백혈구 바이올렛-요오드 복합체를 형성하여 얼룩의 보유를 향상시킨다.

탈색: 알코올 또는 아세톤은 도말을 탈색하는 데 사용됩니다.

그람 양성 박테리아는 두꺼운 펩티도 글리 칸 층으로 인해 자주색을 유지합니다.

그람 음성 박테리아는 보라색을 잃고 무색이됩니다.

카운터 염색: 대조적 인 얼룩 (예 : Safranin)이 적용되어 탈색 된 그램 음성 박테리아 분홍색\/빨간색을 염색하고 그람 양성 박테리아는 자주색으로 남아 있습니다.

형태 학적 및 구조 정보: 염색 방법은 박테리아 모양 (Cocci, Bacilli, Spirilla), 배열 (체인, 클러스터, 쌍) 및 세포벽 특성의 시각화를 허용합니다.

예비 식별 및 분류:

그람 양성 박테리아 (e.g., 포도상 구균, 연쇄상 구균)는 자주색으로 보이며 종종 특정 감염이나 환경 틈새와 관련이 있습니다.

그람 음성 박테리아 (e.g., 대장균, 위험한 바실러스 균)는 분홍색\/빨간색으로 나타나며 종종 다른 질병 프로파일 또는 항생제 내성 패턴과 관련이 있습니다.

임상 및 진단 중요성: 그램 염색은 그람 양성 및 그램 음성 박테리아가 종종 항생제와 다르게 반응하기 때문에 임상 미생물학에서 초기 항생제 요법을 안내하기 위해 사용되는 빠르고 저렴한 방법입니다.

간단한 염색: 단일 염료를 사용하여 박테리아 형태를 시각화하지만 그람 양성 및 그람 음성 박테리아를 구별하지는 않습니다.

산-빠른 염색: 왁스 세포벽으로 박테리아를 식별하는 데 사용됩니다 (예 :마이코박테리움그램 염색에 내성이있는).

특수 얼룩: 특정 구조 (예 : Endospores, Capsules, Flagella)를 시각화하는 데 사용됩니다.

박테리아 세포의 노화: 오래되거나 부적절하게 고정 된 세포는 얼룩을 정확하게 유지하지 못하여 잘못된 그람 변수 결과를 초래할 수 있습니다.

과잉 식민지화 또는 미색 불충분: 탈색 단계에서 신중한 타이밍이 필요한 결과의 정확도에 영향을 줄 수 있습니다.

모든 박테리아가 그램 염색 가능하지는 않습니다:와 같은 일부 박테리아mycoplasma(세포벽이 없음), 그램 방법과 잘 얼룩이지 마십시오.

왁스 세포벽: Mycobacterium 결핵미화 산이 풍부한 불 침투성 세포벽이있어 그램 얼룩을 포함하여 대부분의 기존 얼룩에 내성이 있습니다.

산성: mycolic acid 층으로 인해M. 튜버쿨로시스산-알코올로 처리 한 후에도 산산-금속이라고하는 특성 인 특정 염료를 유지합니다. 이것은 산-빠른 염색 방법의 기초입니다.

Ziehl-Neelsen (Zn) 염색:

1 차 얼룩: Carbol Fuchsin (적색 염료)은 박테리아를 염색하는 데 사용됩니다.

열 응용: 염료가 밀랍 세포벽에 침투하는 데 도움이되도록 증기 또는 열이 적용됩니다.

탈색: 산-알코올은 비산-빠른 박테리아에서 염료를 씻어내는 데 사용됩니다.

카운터 스테인: 메틸렌 블루는 배경을 염색하기 위해 적용되어 산-빠른 박테리아 (빨간색)가 눈에 띄게 만듭니다.

Kinyoun Stain (콜드 방법):

Zn과 유사하지만 더 농축 된 카볼 푸쉬 신을 사용하여 열이 필요하지 않습니다.

이러한 방법으로 인해 발생합니다M. 튜버쿨로시스파란색 배경에 밝은 빨간 막대로 나타나 다른 박테리아와 구별됩니다.

그것은 기본 얼룩이 아닙니다M. 튜버쿨로시스, 그것은 다음에 사용될 수 있습니다.

수정 된 염색 프로토콜: 일부 연구 또는 진단 방법은 대비를 향상 시키거나 추가 기능을 시각화하기 위해 카운터 스테인 또는 다중 단계 염색 프로세스로 통합 될 수 있습니다.

다른 기술과의 결합: 경우에 따라, 그것은 분화를 위해 산-빠른 염색과 함께 사용될 수 있습니다.M. 튜버쿨로시스다른 산-빠른 박테리아 (예 :노카르디아) 약간 다른 염색 특성을 가질 수 있습니다.

연구 응용 프로그램: 실험실 환경에서는 MyCobacterial Cell Wall의 특정 구성 요소와 상호 작용할 수있는 잠재력을 탐색 할 수 있지만 표준 관행은 아닙니다.

비효율적 인 차별화: 그램 얼룩은 확실하게 구별되지 않습니다M. 튜버쿨로시스왜냐하면:

그것의 두꺼운 미콜 산 층은 탈색 후 류코 결정 바이올렛-요오드 복합체가 유지되는 것을 방지한다.

그것은 일반적으로 그람-변수 또는 그람에 대한 결정을 일으켜 오해의 소지가있는 결과를 초래합니다.

금 표준으로 산성 고안된 염색: 산-빠른 염색은 mycobacteria를 식별 할 때의 특이성과 신뢰성에 선호되는 방법입니다.

빠른 식별: 산-빠른 염색은 빠른 감지를 허용합니다M. 튜버쿨로시스임상 샘플 (예 : 가래)에서 조기 진단 및 치료를 안내합니다.

다른 병원체와의 분화: 그것은 마이코 박테리아를 다른 박테리아와 같은 다른 박테리아와 구별하는 데 도움이됩니다.연쇄상 구균(그람 양성) 또는대장균다른 염색 특성과 임상 적 영향을 가진 (그람 음성).

6. 제한 및 고려 사항

감광도: 산-빠른 염색은 낮은 수의 박테리아를 감지하지 못할 수 있으며, 확인을 위해 배양 또는 분자 방법 (예 : PCR)이 필요합니다.

특성: mycobacteria에 대해 매우 구체적이지만 산-빠른 염색은 종을 구별 할 수 없습니다.마이코박테리움 (e.g., M. 튜버쿨로시스vs.M. Avium). 종 수준의 식별에는 추가 테스트 (예 : 배양, 생화학 적 분석 또는 핵산 증폭 시험)가 필요합니다.

• 눈 자극 :이 물질은 눈에 자극적 인 영향을 미치며 발적, 통증 및 찢어짐과 같은 불편한 증상을 유발할 수 있습니다. 물질이 눈에 들어가면 즉시 많은 물로 헹구고 의학적 지원을 받으십시오.
• 피부 자극 : 접촉은 피부에 발적, 가려움증, 통증 또는 화상을 유발할 수 있습니다. 장기 노출 또는 과도한 사용은 피부암의 위험을 증가시킬 수 있습니다.
• 호흡기 자극 :이 물질의 먼지 또는 증기를 흡입하면 호흡기에 자극을 유발하여 기침 및 호흡 곤란과 같은 증상이 발생할 수 있습니다.
• 잠재적 발암 성 : 동물 실험은 그것이 잠재적 발암 효과가 있음을 보여 주었다. 따라서이 물질의 장기 노출 또는 섭취는 암 위험을 증가시킬 수 있습니다.
• 생식 독성 : 또한 생식 독성이 있으며 생식력과 태아 발달에 악영향을 미칠 수 있습니다.

• 수질 오염 : 수체에 오염을 일으켜 수생 유기체의 생존과 재생산에 영향을 줄 수 있습니다. 물 에서이 물질의 지속성과 생체 축적은 장기적인 환경 영향으로 이어질 수 있습니다.
• 토양 오염 : 토양으로 배출되면 토양 특성을 바꾸고 식물 성장 및 미생물 군집에 영향을 줄 수 있습니다.

• 직접 접촉을 피하십시오 : 사용할 때 피부와 눈과의 직접 접촉을 피하십시오. 사용하기 전에 장갑, 마스크 및 고글과 같은 적절한 보호 장비를 착용해야합니다.
• 적당한 사용 : 제품 지침과 의사의 조언을 따르고, 물질을 적당히 사용하고, 과도한 사용이나 물질에 대한 장기 노출을 피하십시오.
• 적절한 보관 : 어린이의 손이 닿지 않도록하십시오. 저장 환경이 건조하고 환기되고 화재 공급원에서 멀리 떨어져 있는지 확인하십시오.
• 환경 보호 처리 : 폐기 된 물질은 환경 오염을 피하기 위해 지역 환경 규정에 따라 처리되어야합니다.